Húgyúti d-arabinitol/l-arabinitol szintek hosszú távú antibiotikum-terápiában részesülő csecsemőknél

ABSZTRAKT

A hosszú távú antibiotikum-terápia a mycosis egyik fő kockázati tényezője. A vizelet d -arabinitol/l -arabinitol (d -/l -ARA) arányát (több Candida faj biomarkere) gázkromatográfiával határoztuk meg elektronfogó detektorral 51 tartós antibiotikum-terápiában részesülő csecsemő mintáiban. Noha ezek közül a gyermekek közül 47-ben magasabb volt a d -/l-ARA arány, mint az egészséges kontrollokban (a d-arabinitol P d -/l-ARA aránya számos Candida faj jellegzetes fő metabolitja (2). A d-arabinitol/l - Az arabinitol (d -/l -ARA) arány a vizeletben gázkromatográfiával gyorsan meghatározható, mint a candidiasis biomarkere (15). Egy korábbi vizsgálatban meghatároztuk egészséges gyermekek vizelet d -/l -ARA arányát, megmutatva hogy az életkor előrehaladtával csökken és hogy a 3,6-os érték (átlag + 2 szórás [SD]) a normálértékek felső határa a 0 és 1 év közötti csoportban (19). Ebben a tanulmányban a következőkről számolunk be: vizelet d -/l -ARA arányok és azok változásai egy nagy rizikójú, hosszú távú antibiotikum-terápiában részesülő csecsemők csoportjában.

A vizsgálatokat vizeletmintákkal végeztük. Mintegy 1-2 ml vizeletből vett mintákat gyűjtöttünk, és általában közvetlenül a mintavétel után elemeztük őket. Szükség esetén –20 ° C-on tárolták az elemzésig. A d/l-ARA arányt trifluor-ecetsav-származékként határoztuk meg gázkromatográfiával, elektron befogó detektorral (19). A vérkultúrákhoz BacT/Alert módszert alkalmaztunk. A Candida-t Sabouraud agaron tenyésztettük vér-, vizelet- és nyálkahártya-tamponokból. Minden gyermek szérumát megvizsgáltuk a Candida antigénről a Pastorex Candida teszttel, valamint az anti-Candida mannan antitestekről az immunfluoreszcencia IFp teszttel (amely fluoreszceinnel jelölt anti-immunglobulin G humán globulint használ) (4).

A változó eloszlások normalitását Kolmogorow-Smirnow és Shapiro-Wilk tesztekkel igazoltuk. Az eredményeket átlagértékekként, szórásokkal mutatjuk be. Az egy csoporton belüli elő- és utókezelés eredményeit összehasonlítottuk Student-féle próbával a függő minták esetében. A három csoport közötti különbségeket Kruskal-Wallis varianciaanalízis teszt segítségével állapítottuk meg (a nem homogén varianciák miatt az eredményeket Levene-próbával ellenőriztük). Diszkrimináns elemzést végeztünk annak megállapítására, hogy a d -/l -ARA arány használható-e a vizsgálati csoportok osztályozására.

Az antibiotikum-terápia volt az első kockázati tényező, amely társult a gombás fertőzésekkel. Samonis és mtsai. kimutatta, hogy széles spektrumú antibiotikumok használata fokozta a gyomor-bél traktus kolonizációját élesztőszerű gombasejtek által (16). A széles spektrumú antibiotikumok széles körű használata nagymértékben hozzájárult a gombás fertőzések gyakoribb előfordulásához.

Vizsgálatunkban azt találtuk, hogy a d -/l -ARA arány a hosszú távú antibiotikum-terápiát követő gyermekek alcsoportjában, akik nem mutattak szisztémás fertőzés tüneteit (A csoport), magasabbak voltak, mint a kontroll csoportban (C). A statisztikai elemzés két különböző módszere, azaz a csoportok összehasonlítása és a diszkrimináns elemzés megerősítette, hogy a d -/l-ARA arány magasabb volt a hosszú távú antibiotikum-terápia után. Ez a megállapítás összhangban áll az állatokon végzett vizsgálatok eredményeivel, amelyekben az antibiotikumok beadása után megnövekedett d -/l-ARA arányt is találtak (21).

Egy korábbi tanulmányban azt tapasztaltuk, hogy a d -/l -ARA arány exponenciálisan csökkent az életkorral rendelkező egészséges gyermekeknél. A legmagasabb értékeket a legfiatalabb gyermekeket (0 és 1 év közötti csecsemők) tartalmazó csoportban találtuk (19). A jelenlegi jelentés vizsgálati csoportja azonos korú csecsemők csoportja volt.

Patkányokkal végzett vizsgálatokban Wong és mtsai. arra a következtetésre jutott, hogy a d -arabinitol szintje azért emelkedett, mert csökkent az azt metabolizálni képes baktériumok száma (21). Másrészt bebizonyosodott, hogy az opportunista Pseudomonas aeruginosa deaktiválja a Candida albicans filamentumokat és megöli a gombát (5). Valószínű, hogy a bakteriális antagonisták Candida-dá történő redukálása az egyik mechanizmus, amellyel az antibiotikumok felborítják a baktérium-gomba egyensúlyt, lehetővé téve a Candida albicans fejlődését, és ezáltal a d -/l-ARA arány növekedését. Amikor a flukonazolt profilaxisként adtuk be csecsemőknek, megfigyeltük ennek a biomarkernek a szintjének csökkenését (nem publikált adatok).

Jelen tanulmányban a normál feletti d -/l -ARA arányú négy gyermek közül háromnak (B alcsoport) nem volt mikrobiológiailag igazolt invazív candidiasis; azonban mindegyiküknél az antibiotikum-terápia időtartama hosszabb volt, mint az A-alcsoport átlaga (51, illetve 32 nap). A B alcsoportba tartozó gyermekeknél súlyos veleszületett rendellenességek (vagy intrauterin dystrophia [4. beteg]) voltak, ezért az invazív candidiasis kockázati csoportjába tartoztak (7, 12). A B alcsoportba tartozó gyermekek közül hármat kórházba szállítottak az intenzív osztályon (2–4 hét).

Az empirikus gombaellenes kezelés a választott kezelés a számos diagnosztikai nehézség és a magas mortalitás fényében (14). Ennek ellenére egyik gyermek (A és B csoport) sem részesült empirikus szisztémás gombaellenes kezelésben (csak orális nystatin, amely nem szívódik fel a gyomor-bél traktusból) egyidejűleg antibiotikum-terápiával a d -/l-ARA arány meghatározása előtt. A klinikai megjelenés, a kockázati tényezők figyelembevétele és a gázkromatográfiai elemzés alapján a B csoportba tartozó gyermekek flukonazolt kaptak. A d -/l -ARA szint normalizálódott és klinikai állapotuk javult, ami alátámasztja a Candida fertőzés klinikai gyanúját, bár mikrobiológiailag nem erősítették meg. Hasonló eredményeket mutattak be újszülöttekkel Sigmundsdóttir et al. (17) Ha feltételezzük, hogy a megnövekedett d -/l -ARA aránnyal rendelkező csecsemők közül háromnak (azaz a B alcsoportban levő határértéknél magasabb értéknek), amely a teljes vizsgált csoport 5,9% -át képviseli, invazív candidiasis volt (13, 17), ez azt sugallja, hogy a hosszú távú antibiotikum-terápiát továbbra is magas kockázatú tényezőnek kell tekinteni, különösen azért, mert az összes gyermek időnként született, legalább 2400 g testtömegű volt, és az antibiotikum-terápia során orális nystatint kapott.

Egy retrospektív tanulmányban Rabalais és mtsai. (12) arról számolt be, hogy az intenzív osztályon kezelt (2500 g-nál nagyobb) születési súlyú gyermekeknél (a fő kockázati tényező) a tenyésztési módszerekkel azonosított gombás fertőzések gyakorisága 0,6% volt. Ebben a vizsgálatban az antibiotikum-terápia átlagos időtartama 28,1 nap volt (7-84 nap); vizsgálatunkban ez az átlag körülbelül egy héttel hosszabb volt, 35,4 nap (tartomány: 21–85 nap). Figyelemre méltó, hogy a két mucocutan kolonizációjú gyermek d -/l -ARA aránya a kóros határok alatt volt, ami erősen alátámasztja azt a következtetést, hogy a kolonizáció nem zárja ki a d -/l -ARA arányok használatát az invazív candidiasis markerként ( 21) vagy orális vagy hüvelyi candidiasis és candiduria (6).

Két gyermek flukonazol-kezelését figyelték, és az eredmények azt mutatják, hogy a d -/l-ARA arány jól korrelált a betegek klinikai állapotával, tükrözve a kezelési hatásokat (2. ábra). A candida fertőzések magas mortalitással járnak, különösen a d -/l-ARA arányú gyermekeknél a veszélyeztetett csecsemők vizeletmintáiban. A megállapított d -/l-ARA arány jól korrelált a betegek klinikai és kezelési eredményeivel. Figyelembe véve a csecsemők szisztémás gombás fertőzésének tenyésztéssel és antitestvizsgálatokkal történő gyors megerősítésének ismert nehézségeit, a d -/l-ARA arány monitorozása értékes segítségnek tűnik az orvos számára a szisztémás gombaellenes kezelés megkezdésével kapcsolatos döntések meghozatalában. Nagyszámú, előnyösen számos központból származó, tenyésztési eredmények által támasztott adatok azt mutatják, hogy a d -/l-ARA arány önmagában lehet-e a szükséges laboratóriumi módszer a szisztémás gombás fertőzés diagnosztizálására.