Könyvespolc

NCBI könyvespolc. A Nemzeti Orvostudományi Könyvtár, az Országos Egészségügyi Intézetek szolgáltatása.

Walker HK, Hall WD, Hurst JW, szerkesztők. Klinikai módszerek: A történelem, a fizikai és a laboratóriumi vizsgálatok. 3. kiadás. Boston: Butterworths; 1990.

Klinikai módszerek: A történelem, a fizikai és a laboratóriumi vizsgálatok. 3. kiadás.

Janice T. Busher .

Meghatározás

Több száz fehérje van feloldva a plazmában. Ezen fehérjék koncentrációjának mérésével a klinikus információkat szerezhet a különböző szervrendszerek betegségállapotairól. A fehérje mérését szérumon végzik, amely folyadék marad, miután a plazma alvadt, így eltávolítva a fibrinogént és az alvadási faktorok nagy részét. Az összes fehérjetartalom ad némi információt a beteg általános állapotáról; klinikailag hasznosabb adatokat kapunk a teljes fehérje frakcionálásával. A normál szérumfehérje szint 6-8 g/dl. Az albumin 3,5–5,0 g/dl-t tesz ki, a fennmaradó rész pedig az összes globulin. Ezek az értékek az egyes laboratóriumok szerint változhatnak.

Technika

A szérumfehérje mérésének legszélesebb körben alkalmazott módszere a biuret reakció. A reakció elve az, hogy a szérumfehérjék nátrium-hidroxidban lévő réz-szulfáttal lila "biuret" komplexet képeznek. Az ibolya szín intenzitása arányos a fehérje koncentrációjával.

Az albumint általában festékkötési technikával mérik, amely kihasználja az albumin azon képességét, hogy stabil komplexet képezzen a bróm-krezol-zöld színezékkel. A BCG-albumin komplex elnyeli a fényt a meg nem kötött festéktől eltérő hullámhosszon. Ez a módszer túlbecsülheti az albumint azáltal, hogy más fehérjékhez kötődik. A teljes globulin-frakciót általában úgy határozzuk meg, hogy az albumint kivonjuk a teljes fehérjéből.

Az elektroforézis a szérumfehérjék további frakcionálásának leggyakoribb eszköze. Ebben a folyamatban a megfelelő pufferolt oldószerekben lévő fehérjeoldatokat egy táptalajra, például papír- vagy keményítőtömbökre helyezzük, és elektromos áramnak tesszük ki. Elektromos töltésük eltérései miatt a fehérje komponensek különböző sebességgel vándorolnak az anód vagy a katód felé.

Immunelektroforézist alkalmaznak a gamma-frakció növekedésének értékelésére. Minden immunoglobulin típusra specifikus antiszérumokat használnak annak meghatározására, hogy a növekedés monoklonális (azaz egy immunglobulin típusból áll) vagy poliklonális (azaz sok különböző immunglobulin számának növekedése miatt).

Alaptudomány

Az albumin a szérumban jelen lévő összes fehérje több mint felét teszi ki. A test teljes albumin-készletének körülbelül 30-40% -a található az intravaszkuláris rekeszben. A fennmaradó rész extravaszkuláris, és főleg az izmok és a bőr intersticiális terében helyezkedik el. Az albumin kis mennyiségben megtalálható a test különböző folyadékaiban is, például verejtékben, könnyekben, gyomornedvben és epében.

Az albumin nem diffundál szabadon az érintetlen vaszkuláris endotheliumon keresztül. Ezért a kritikus kolloid ozmotikus vagy onkotikus nyomást biztosító fő fehérje szabályozza a víz és a diffundálható oldott anyagok áthaladását a kapillárisokon. Az albumin a kolloid ozmotikus nyomás 70% -át teszi ki. Nagyobb ozmotikus erőt fejt ki, mint ami kizárólag a plazmában oldott molekulák száma alapján számolható el, és ezért nem pótolható teljesen inert anyagokkal, például dextránnal. Ennek oka az, hogy az albumin normális vér pH mellett negatív töltéssel rendelkezik, és vonzza és visszatartja a kationokat, különösen a Na + -ot az érrendszerben. Ezt hívják Gibbs – Donnan-effektus. Az albumin kis számú Cl - iont is megköt, ami növeli negatív töltését és Na + - ionok visszatartó képességét a kapillárisokban. Ez a fokozott ozmotikus erő azt eredményezi, hogy a kolloid ozmotikus nyomás 50% -kal nagyobb, mint önmagában a fehérjekoncentráció esetén.

Az albumin a bilirubin, hormonok, fémek, vitaminok és gyógyszerek szállítására szolgál. Fontos szerepe van a zsíranyagcserében, mivel megköti a zsírsavakat és oldható formában tartja a plazmában. Ez az egyik oka annak, hogy a hiperlipémia a hipoalbuminémia klinikai helyzeteiben jelentkezik. A hormonok albuminnal történő kötődése szabályozza a rendelkezésre álló szabad hormon mennyiségét. Negatív töltése miatt az albumin képes a plazma kationjainak kiegyensúlyozásához szükséges anionok egy részét is előállítani.

Az albumint a májban szintetizálják. A szintézis sebessége normál egyéneknél állandó, 150-250 mg/kg/nap dózisban, ami napi 10-18 g albumint termel egy 70 kg-os embernél. A máj kapacitásának kevesebb mint felénél termeli az albumint. Az albuminszintézist befolyásoló elsődleges tényezők közé tartozik a fehérje- és aminosav-táplálkozás, a kolloid ozmotikus nyomás, bizonyos hormonok hatása és a betegség állapota. Az éhezés vagy a fehérjehiányos étrend az albuminszintézis csökkenését okozza, amíg a hiányállapot fennmarad. Normális egyénnél a máj fokozza az albuminszintézist, reagálva a portális vér által biztosított fehérjeszintű étkezések után megnövekedett aminosavakra. Az extravaszkuláris kolloid nyomás csökkenése stimulálja az albumin szintézisét, és úgy gondolják, hogy a májban hat. A pajzsmirigyhormon, a kortikoszteroidok, a növekedési hormon és az inzulin mind növelheti az albumin szintézisét.

Az albumin lebomlásának fő helye nem ismert. Úgy tűnik, hogy az albumint olyan helyeken katabolizálják, amelyek képesek gyorsan egyensúlyba lépni a vérárammal. Aminosavakká bomlik, amelyeket felhasználnak a sejt energiaigényéhez, vagy szekretálódik az extracelluláris aminosavak készletébe.

A globulin-frakció több száz szérumfehérjét tartalmaz, beleértve hordozófehérjéket, enzimeket, komplementet és immunglobulinokat. Ezek többségét a májban szintetizálják, bár az immunglobulinokat a plazmasejtek szintetizálják. A globulinokat elektroforézissel négy csoportra osztják. A négy frakció α1, α2, β és γ, az anód és a katód közötti vándorlási mintázatuktól függően. A globulin-frakció növekedése általában az immunglobulinok növekedéséből adódik, de más fehérjék növekedése is előfordulhat olyan kóros állapotokban, amelyek jellegzetes elektroforetikus mintákkal rendelkeznek (lásd a 101.1., 101.2. Ábrát). Az alultápláltság és a veleszületett immunhiány a csökkent szintézis miatt a teljes globulin csökkenését okozhatja, a nephrotikus szindróma pedig a vesén keresztüli fehérjevesztés következtében csökkenést okozhat.

101.1. Ábra

Normál szérumfehérje elektroforézis.

101.2. Ábra

Szérum fehérje elektroforézis poliklonális gammopathiával.

Az immunglobulinok (azaz antitestek) főleg a γ régióban vándorolnak, de némelyik a β és α2 régiókban is vándorol. Minden immunglobulin molekula két nehéz láncból áll, amelyek ugyanabba az osztályba tartoznak, és két könnyű láncból, amelyek szintén egyformák. Mindegyik nehéz láncnak van egy variábilis régiója (amelyben az aminosav-helyettesítők különböztetik meg az egyes láncokat a másiktól) és egy állandó régió (amelyben nagyon kevés aminosav-különbség van bármely más, a nehézlánc-típusú immunglobulin állandó régiójától). A könnyű láncok λ vagy κ típusúak, állandó és változó régióval rendelkeznek. A különféle típusú immunglobulinokat nagybetűkkel nevezik meg, amelyek megfelelnek a nehéz lánc típusuknak: IgG, IgA, IgM, IgE és IgD. A normál szérum immunglobulinszintjének háromnegyede IgG típusú. A baktériumok és vírusok ellen számos antitest IgG.

Az IgG molekulák normál gyűjteménye a plazma sejtek különböző klónjaiból előállított különböző IgG antitestek apró mennyiségéből áll; így poliklonális. Ha egyetlen klón elkerüli a szokásos kontrollokat, akkor túlzottan szaporodhat és szintetizálhatja a monoklonális fehérje feleslegét egyetlen nehézlánc osztályú és könnyű lánc típusú.

Klinikai jelentőség

Az egyetlen klinikai helyzet, amely a szérum albumin emelkedését okozza, az akut dehidráció. Különböző klinikai entitások csökkent albuminszintet eredményeznek, akár depressziós szintézissel, akár megnövekedett veszteségekkel. Az albuminszintézis csökkenését a végstádium májbetegsége, a bél felszívódási szindrómái és a fehérje-kalória alultápláltság okozza. Az albuminvesztés például a nephrotikus szindróma és a súlyos égési sérülések, mivel a bőr az albumin legfontosabb kiegészítő tárolója. A szérum albumin csökkenésének következménye a folyadék eltolódása az intravaszkulárisból az interstitialis térbe, ami intravaszkuláris térfogat kimerülést és ödéma képződést eredményez.

A globulin frakció bármilyen növekedését vagy csökkenését szérum elektroforézissel kell értékelni. A mintát vizuálisan ellenőrizni kell, hogy nincsenek-e rendellenességek az egyes régiókban.

Az α1 frakció főleg α1 antitripszinből áll. Ennek a frakciónak a jelentős csökkenése figyelhető meg veleszületett α1 antitripszinhiányos betegeknél; növekedés tapasztalható akut gyulladásos rendellenességekben, mivel az α1 antitripszin egy akut fázisú reagens.

Az α2regionban vándorló fő fehérjék közé tartozik az α2 makroglobulin és a haptoglobin. Növekedik az α2 makroglobulin a nephroticus szindrómában, amikor alacsonyabb molekulatömegű fehérjék vesznek el a vizeletben. A haptoglobin stressz, fertőzés, akut gyulladás vagy szöveti nekrózis hatására emelkedik, valószínűleg a szintézis stimulálásával. A haptoglobin szint csökken egy hemolitikus reakció után, mert a haptoglobin komplexet képez a szabad hemoglobinnal és kiürül a keringésből.

A fő β-globulin a transzferrin. Az emelkedés súlyos vashiány esetén fordul elő. A C3, C4 és C5 komplementkomponensek szintén a β régióban vándorolnak.

A γ régió leggyakoribb rendellenességei egy széles alapú poliklonális növekedés vagy egy keskeny monoklonális tüske. A poliklonális növekedés krónikus fertőzések, kötőszöveti megbetegedések és májbetegségek esetén figyelhető meg. A monoklonális tüskék myeloma multiplexre, Waldenstrom makro-globulinémiájára, primer amiloidózisra, limfómára vagy monoklonális gammopathiára utalnak. A monoklonális tüskére utaló esetleges eltéréseket a y régióban immunoelektroforézissel.

A hipogammaglobulinémiát a γ komponens csökkenése jellemzi. Veleszületett immunhiányos szindrómákban vagy olyan betegségekkel társul, mint a nephroticus szindróma, krónikus limfocita leukémia és kortikoszteroid kezelés.