Kis léptékű kísérlet fágalapú probiotikus étrend-kiegészítő alkalmazásával az E. coli utazó hasmenésének megelőzésére

Cikk-kiegészítés

Teljes cikk
Ábrák és adatok
Hivatkozások
Idézetek
Metrikák
Újranyomtatások és engedélyek
PDF

Absztrakt

Az utazók hasmenését (TD) az Escherichia coli okozza az esetek 30% -ában. Kidolgoztunk egy fág-koktélt az E.coli, Shigella flexneri, Shigella sonnei, Salmonella enterica, Listeria monocytogenes vagy Staphylococcus aureus által okozott TD megelőzésére, és megvizsgáltuk annak hatékonyságát a nem patogén Lac (-) E törzs okozta fertőzésekkel szemben. .coli K12 C600 állat- és emberkísérletekben. Mind az állat-, mind az emberi kísérletek 6. napján az E. coli K12 C600 törzset 10 4 CFU/g egér ürülék és 106 CFU/g emberi ürülék titerében detektáltuk a kontroll (kezeletlen) csoportokban, miközben nem volt kimutatható. bármelyik (fágkezelt) csoport mintáiban kimutatták. Ezeknek az eredményeknek nagy jelentősége van, mivel a koktélban szereplő eredeti kolifágok széles gazda-tartományban vannak, beleértve az ETEC, az EAEC és az EHEC törzseket, amelyek súlyos TD.

Háttér és célok

Anyagok és metódusok

Online közzététel:

1. ábra: Az EcD7 colifág genomjának összehasonlítása a T4-szerű Phi1 és RB49 vírusok affin fágjaival.

Online közzététel:

2. ábra: A V18 colifág genomjának összehasonlítása a Myoviridae rv5, 2 JES-2013, vB_EcoM_FFH2 és vB_EcoM-FV3 affin fágjaival.

Online közzététel:

3. ábra: Az EcD7 kolifág elektronmikroszkópos felvétele (nagyítás × 80 000).

Online közzététel:

4. ábra: A V18 colifág elektronmikroszkópos felvétele (nagyítás × 80 000).

4. ábra: A V18 kolifág elektronmikroszkópos felvétele (nagyítás × 80 000).

Számos tesztet végeztek a bakteriofágok stabilitásának jellemzésére: ellenállás a megemelkedett hőmérséklettel, a pH-változásokkal és a kloroformmal szemben. A fágok ellenállása a megnövekedett hőmérséklettel 50–85 ° C tartományban volt megfigyelhető. Fűtött mintákból a lepedék mennyiségi meghatározását Gratia kettős agar átfedési módszerrel végeztük. Kloroformos kezelést (és további centrifugálást) alkalmaztunk a baktériumsejtek és törmelék fág-lizátumokból történő eltávolításának legolcsóbb módszereként, hogy azokat a mikroszűrés előtt elősterilizáljuk. A fág-lizátumok melegítése szintén jól ismert elősterilizációs lépés. Tehát ezek a jellemzők nagyon fontosak a jövőbeni fágalapú termékek előállításához. A fág-lizátumokat egy órán át szobahőmérsékleten inkubáltuk pufferoldatokkal, specifikus pH-értékekre kalibrálva, hogy meghatározzuk a bakteriofágok savas és lúgos pH-értékekkel szembeni ellenálló képességét. Az inkubálást követően Gratia módszerrel megbecsültük a fág-lizátumokban található fágok titerét.

A fágalapú étrend-kiegészítő folyékony formában volt, és tartalmazott édesgyökér-szirupot, alma-pektint és glicint. Az édesgyökér szirup alkalmas görcsoldó, burkoló tulajdonságokra és az érzékszervi (íz) tulajdonságok javítására. Az alma pektin alkalmas lehet toxin szorbensként és viszkozitásszabályozóként. A glicin alkalmas lehet a raktárban lévő fág-titer stabilizátoraként és antioxidánsként is.

A fágalapú probiotikus étrend-kiegészítő farmakokinetikáját kinyert egerek * modelljén (10 egyed) vizsgálták egyszeri intragasztrikus injekció után.