Súlycsökkenés azoknál az állatoknál és embereknél, akiket a hagyományos arab és iszlám orvostudományban használt négy gyógynövény kombinációjával kezelnek „súlyszinttel”.

Omar Said

1 Antaki Center for Herbal Medicine Ltd, Kfar Kana 16930, Izrael

2 Kutatási és Fejlesztési Regionális Központ, a Galileai Társaság és a Qasemi Kutatóközpont, Al-Qasemi Akadémiai Főiskola, P.O. Box 2205, Baga Algharbiya 16930, Izrael

Bashar Saad

2 Kutatási és Fejlesztési Regionális Központ, a Galileai Társaság és a Qasemi Kutatóközpont, Al-Qasemi Akadémiai Főiskola, P.O. Box 2205, Baga Algharbiya 16930, Izrael

3 Szövetséges Orvostudományi Kar, az Amerikai Arab Egyetem Jenin, Jenin, Palesztina

Stephen Fulder

1 Antaki Center for Herbal Medicine Ltd, Kfar Kana 16930, Izrael

Khaled Khalil

1 Antaki Center for Herbal Medicine Ltd, Kfar Kana 16930, Izrael

Eli Kassis

4 Sprunk-Jansen, A/S Strandvejen 100, 2900 Hellerup, Dánia

Absztrakt

1. Bemutatkozás

A túlsúly a nyugati világ egyik legnagyobb egészségügyi kihívása, olyan súlyos klinikai szövődményekkel jár, mint a 2-es típusú diabetes mellitus, az agyi érrendszeri és az iszkémiás szívbetegségek. Az elhízás rendelkezésre álló farmakológiai terápiája anorexiás gyógyszerekre korlátozódik, mint amfepramon és szibutramin, valamint egy malabszorpciós gyógyszer, az orlisztát. Diétához adva az ilyen terápia várhatóan 0,2–0,4 kg-os testsúlycsökkenést eredményez −1 héten, de csak néhány hétig a tolerancia és a mellékhatások miatt [1].

Így mind a négy növényt használják az európai gyógynövénygyógyászatban, és mindegyik más-más felhasználási indikációval rendelkezik. Feltételeztük, hogy ez a négy növény együttesen szinergikus hatást generálhat. Jelen tanulmány célja e négy növény rögzített keverékének biztonságosságának és terápiás hatékonyságának vizsgálata volt. Ami a biztonságot illeti, in vitro és állatkísérleteket végeztünk. Ami a terápiás hatékonyságot illeti, növekményes és tartós testsúlycsökkenésként határoztuk meg azt a vizsgálati periódus alatt: 4 hét a kontrollált állatkísérletben és 3 hónap a nyílt humán vizsgálatban.

2. Anyagok és módszerek

A női palást, az olajbogyó és a vad menta leveleit, valamint a köménymagokat a galileai régióból gyűjtötték össze, árnyékban szárították és finom fokozatúra porították kivonatként az Antaki Ltd Laboratories, Kfar Kana, Izrael. Súlyszintű tablettákat (310 mg tabletta –1) készítettünk a Karmat Micro Encapsulation laboratóriumokban, Kibbutz Ramot Menashe, Izrael. Minden tabletta 60 mg A. vulgaris L.-t, 50 mg O. europaea L.-t, 20 mg Mentha longiforia L.-t, 25 mg C. cyminum L.-t, 7 mg C-vitamint és 148 mg trikalcium-foszfátot tartalmazott.

2.1. Biztonsági és oxidatív stressz elemzés

Patkányokat és patkánymáj-homogenátumokat használtunk a Weighlevel biztonságosságának és antioxidáns hatásainak értékelésére.

2.1.1. LD50

Harminchat hím Sprague-Dawley patkányt (átlagos súly: 153 ± 12 g) négy csoportra osztottunk. Nagy egyszeri Weighlevel dózisokat tettünk közvetlenül mindegyik csoport gyomrába, és 14 napig figyeltük meg az LD50 meghatározását. Az állatkísérleteket 1999-ben a Haifai Technioni Orvostudományi Kar adta meg.

2.1.2. Oxidatív stressz

Az oxidatív stressz reaktív oxigénfajok (ROS) képződéséhez vezet, amelyek a különböző betegségállapotokban fontos patogenetikai szerepet játszanak. A lipidperoxidáció káros hatással van a májsejtek membránjára. A lipidperoxidáció mértékét a tiobarbitursav-reaktív anyag (TBARS) vizsgálaton alapuló technikával mértük, amely detektálja a malondialdehidet (MDA), amely a polyeonsav-zsírsavak in vitro rendszerek peroxidatív bomlásának végterméke [15]. Az analitikai eljárásban a TBARS pontos számszerűsítése érdekében a fehérjét kicsaptuk, mielőtt tiobarbitursavat adtunk a reakcióhoz, míg a minták melegítése előtt antioxidáns butilezett hidroxi-toluolt adtunk hozzá. A patkánymáj homogenizátumokat 100 μM FeSO4-mel ROS-termelő rendszerként inkubáltuk [16, 17] és a termék különböző koncentrációival.

2.1.3. Laktát-dehidrogenáz-vizsgálat

Az intracelluláris enzim laktát-dehidrogenáz (LDH) felszabadulása a nekrotikus vagy toxikus sejtmembrán-repedés következménye. A sejtmembrán integritását a táptalajba kibocsátott LDH-aktivitás mérésével határoztuk meg [18, 19]. Az LDH aktivitást a NADH oxidációját követve figyeltük meg, mivel az abszorbancia csökken 334 nm-en. A reakciót 0,24 mM NADH-t és 0,62 mM piruvátot tartalmazó kálium-foszfát pufferban (40 mM K2HPO4, 10 mM KH2PO4, pH 7,5) hajtottuk végre. A felszabadult LDH százalékát a felülúszóban lévő LDH-aktivitás és a felszabadult LDH-mennyiség plusz a sejtlizátumban mért LDH-aktivitás összegének arányaként határoztuk meg. A humán fibroblasztokat különböző mennyiségű termékkivonattal inkubáltuk, és az LDH aktivitást a táptalajban mértük 24, 48 és 72 órás inkubáció után.

2.1.4. Termogenezis

A hím Sprague-Dawley patkányokat (n = 12) világos és hőmérséklet-szabályozott helyiségben helyezték el (12:12 óra fény: sötét ciklus és 23 ° C), és szabad hozzáférést biztosítottak hozzájuk a vízhez és a szokásos laboratóriumi étrendhez egy hét adaptációhoz. a vizsgálat megkezdése előtt. Az interscapularis barna zsírszövet (IBAT) csíkjait gyorsan kivágták a zsírpárna középső részéből. A szöveteket a következő összetételű Krebs-Ringer-hidrogén-karbonát-pufferrel perfundáltuk: 116,8 mM NaCl, 25 mM NaHCO3, 5,9 mM KCl, 1,2 mM MgSO4, 1,2 mM NaH2PO4, 1,25 mM CaCl2 és 5 mM glükóz. A Weighlevel extraktumot hozzáadtuk a perfúziós puffer közeghez, és a kapott szuszpenziót automatikusan leszűrtük, mielőtt a légzőkamrába került volna. A tápközeget folyamatosan buborékoltattuk 95% O2 és 5% CO2 keverékével [20, 21]. Az IBAT fragmensek légzési sebességét ismételt O2 felvételi meghatározásokat magában foglaló módszerrel mértük, Barde és mtsai. [22] Az O2 parciális nyomást (PO2) Clark O2 elektróddal mértük, amikor az extraktum beadása MO2 változásokat eredményezett [23–25].

2.1.5. Hatásosság csirkéknél

Csirkéket (átlagos tömeg egyenként kb. 100 g) használtunk a vizsgálatunk első szakaszában, mert egyszerű és gyors tesztrendszert képviselnek. A csirkéket standard körülmények között gondozták, és 1 hónapig normál csirkeeledellel (n = 20), 10% Nigella sativa-val dúsított normál étellel (n = 20) és 3% termékporral dúsított normál étellel (n = 20) táplálták. = 20). A testtömeget minden héten gondosan becsülték.

2.1.6. Klinikai vizsgálatok

2.2. Statisztika

A Wilcoxon aláírt rangú tesztet alkalmazták. A csoportok összehasonlítását a Wilcoxon rang-összeg teszt segítségével végeztük. 0,05 szignifikancia szintet állítottunk be. A kapott adatokat átlag ± SEM-ben fejeztük ki.

3. Eredmények

3.1. Biztonsági elemzés

Rendkívül nagy Weighlevel adagra (15,3 g kg -1) volt szükség ahhoz, hogy patkányokban LD50 jusson. Testtömeg alapján ez megfelelne az egy kilogrammnál nagyobb emberi fogyasztásnak. Hasonló eredményeket tapasztaltak in vitro vizsgálatokban az LDH felszabadulás mérésével. Az 1. ábra az eredményeket mutatja az inkubálás 24, 48 és 72 órájában. A kezeletlen kontroll sejtekkel összehasonlítva nem találtak szignifikáns változást az LDH felszabadulásban, akár a termék koncentrációjának növekedése, akár a növekvő inkubációs periódus függvényében.

LDH felszabadulás a tenyésztett emberi fibroblasztokból. Az LDH felszabadulást 24, 48 és 72 órával értékeltük kontroll sejtekben és súlyszinttel kezelt sejtekben (180 és 360 mg ml -1). A megadott értékek három párhuzamosan végzett független kísérlet átlagának ± SEM értékét jelentik.

3.2. Antioxidáns

A patkány máj homogenizátumának ferroszulfáttal történő inkubálásával kiváltott lipidperoxidációt a 2. ábra az MDA termelés mértékeként fejezi ki. A termék nagyon alacsony dózisának (10 μg ml -1) hozzáadása a táptalajhoz jelentősen csökkenti az MDA felszabadulást 0,89 ± 0,05-ről 0,53 ± 0,03 nM mg-1 fehérjére (P-1) tovább csökkenti az MDA-koncentrációt 0,28 ± 0,03-ra nM mg −1 fehérje (P −1 (2. ábra).

A súlyszint-kivonat különböző hatásai a patkánymáj-homogenizátumok MDA-felszabadulására, amelyeket 100 μM ferroszulfáttal inkubáltunk 0,01, 0,05 és 0,1 mg súlyszint ml-1 jelenlétében és hiányában. A megadott értékek három párhuzamosan végzett független kísérlet átlagának ± SEM értékét jelentik.

3.3. Túlsúly ellen

A súlyszint termogenezisét patkány IBAT csíkokban határoztuk meg. A megadott értékek három párhuzamosan végzett független kísérlet átlagának ± SEM értékét jelentik.

3.5. Klinikai vizsgálatok

A vizsgálatba felvett 80 alany átlagéletkora 34,3 ± 9,68 (19–53 tartomány) volt. Átlagos súlyuk 90 ± 5 kg volt, magasságuk pedig 169 ± 5 cm, ami a 31,3 ± 1,1 kg m – 2 BMI-nek felel meg. A nők az alanyok 48% -át tették ki, koruk 49–67 év volt. Az alanyok csaknem fele néhány gyógyszert szedett elsősorban ischaemiás szívbetegség, diabetes mellitus és/vagy magas vérnyomás kezelésére. Az összes gyógyszer változatlan maradt a vizsgálati időszak alatt, mivel a betegek állapota stabil volt. Tizennégy alanyot zártak ki, mivel megsértették a protokollt, nyolcat a megfelelés hiánya miatt, hatot pedig a tervezett látogatások hiánya miatt. Ezért a fennmaradó 66 alany esetében megadják a hatékonyságot és a tolerálhatóságot.

A súlyszintet mind a 66 beteg jól tolerálta, és egyikük sem észlelt kisebb vagy nagyobb káros hatást. A terméket más cukorbetegség, magas vérnyomás, koleszterin és ischaemiás szívbetegségek kezelésében jól tolerálták. Az 5. ábra összefoglalja a Weighlevel hatékonyságát ebben a 66 alanyban. Jelentős és progresszív súlycsökkenést figyeltek meg havonta, átlagosan 1 kg-os −1 héten, 3 hónap alatt. A súly a kiindulási értékről 90,5 ± 1,2-ről 78,5 ± 1,4 kg-ra csökkent 3 hónapon belül (P - 2 (túlsúlyos) (5. ábra (a)), összehasonlítva azokkal, akiknek BMI-je> 30 kg m - 2 (elhízott) (5. ábra ( A BMI 3 hónap elteltével 28,5 ± 1,2, illetve 32,1 ± 1,8 kg m - 2-ről 24,5 ± 1,4, illetve 27,5 ± 2,2 kg m - 2-re csökkent a túlsúlyos és az elhízott csoportokban. kontrollcsoport, akit arra kértek, hogy három fő étkezésre korlátozza (5. ábra (c) ábra).

A Weighlevel klinikai hatékonysági vizsgálata 66 önkéntes humán önkéntesnél, akiket rendszeres látogatásaik alapján választottak ki általános orvosukhoz öt különböző galileai klinikán, ahol megkérdezték tőlük, hogy hajlandók-e gyógynövényes terápiát vállalni fogyás céljából. Az embereket három csoportra osztották. Az első csoport testtömeg-indexe 25-30 kg m - 2 (a), a második csoport BMI> 30 kg m - 2 (b) és a kontroll csoport (c). A megadott értékek az átlag ± SEM értéket képviselik.

4. Megbeszélés

A jelenleg alkalmazott hagyományos arab-iszlám gyógynövényterápia nagymértékben nincs kihasználva, bár hatékony új koncepciókat és az aktív növényi vegyületek gazdag forrását kínálhatja. Tudomásunk szerint jelenleg egyetlen arab országban sincs hagyományos arab orvosképzési program, és az arab orvoslás nem jelent meg olyan átfogó egészségügyi alternatívaként, amely összehasonlítható más, nem nyugati egészségügyi modellekkel. A legutóbbi felmérések szerint több mint 2600 növényfaj található a Földközi-tenger térségében, és ~ 200–250 növényt említenek gyógynövényként való felhasználásuk miatt [26–28]. Csoportunk újonnan végzett etnofarmakológiai felmérése feltárta, hogy régiónkban még mindig több mint 450 növényfajt használnak (Said O., Khalil K. és Saad B., nem publikált adatok). Jelen tanulmányban négy olyan növényi gyógymód kombinációját készítettük el, amelyek hagyományosan súlycsökkentő hatásukról ismertek. Ezt a kombinációt Weighlevelnek hívják.

Az A. vulgaris L., a weighleveli fő gyógynövény ajánlott hivatalos dózisa a szárított növény 5–10 g-−1. Napja [7]. A Weighlevel magas szintű biztonságát mutattuk. Patkányokban az LD50 által meghatározott toxicitást csak nagy, ~ 5 g kg -1 koncentrációknál figyelték meg. A 360 mg ml -1 koncentrációk nem mutattak sejttoxicitást az LDH tesztben. Mégis, az antioxidáns tulajdonságokat már 0,01 mg/ml koncentrációnál alacsonyabb koncentrációban, 0,05 mg/ml koncentrációnál pedig szignifikánsabbá tették. A magasabb koncentrációk nem járultak hozzá lényegesen ezekhez a tulajdonságokhoz. Ezek a megfigyelések, amelyek nagyon magas terápiás indexet mutatnak (a hatásos és a toxikus dózisok közötti különbség), magyarázhatják a káros hatás hiányát a vizsgált betegeknél.

A klinikai eredmények azt mutatják, hogy a Weighlevel biztonságos és jól tolerálható mind a 66 alanynál, és terápiás szempontból is hatékony, mivel a fogyás minden alanyban növekményes és állandó volt a 3 hónapos vizsgálati időszak alatt.

A klinikai gyakorlatban tapasztaltak szerint a szinergikus gyógyszerek kisebb adagjai jobb terápiás hatékonyságot eredményezhetnek, kevesebb mellékhatással. Az étrendhez hozzáadva jelenleg rendelkezésre álló gyógyszerek várhatóan 0,2–0,4 kg-os testsúlycsökkenést eredményeznek –1 héten [1]. A jelen tanulmányban minden alanyot arra kértek, hogy folytassa az étkezés szokásos szokásait, de naponta csak három fő étkezést fogyasszon, anélkül, hogy harapnivalók lennének közöttük. Megfigyeltük a -1 vizsgálati héten -1 kg-os súlycsökkenést a 12 vizsgálati hét során, így 3 hónap alatt ~ 12 kg-mal csökkentettük az átlagos átlagos testsúlyt. 14 alany kizárása a megfelelés hiánya, nem pedig a hatékonyság hiánya volt.

Amint azt a csirkéken végzett kontrollált vizsgálatok igazolják, a csökkent súlygyarapodás 4 hét alatt jelentős volt a vizsgálati csoportban. Ez tükrözhette a Weighlevel toxikus hatását ezekben a csirkékben. Mindhárom csirkecsoport, amelyet azonos minőségű és mennyiségű normális csibetáppal etettek, a négy vizsgálati hét előtt és alatt látszólag egészséges volt, és a három csoportba tartozó csirkék általában megnövelték a súlyát. A pozitív kontrollcsoport súlygyarapodása azonban nem volt lényegesen magasabb a kontrollcsoportnál, míg a vizsgálati csoportban szignifikánsan kisebb volt. Ezért valószínűbbnek tűnik, hogy ezeknél a csirkéknél a Weighlevel megfigyelt hatása a megnövekedett és meghosszabbodott jóllakottsági időnek és a teltségérzetnek, valamint a megnövekedett bazális anyagcsere-sebességnek tudható be.

Feltételezzük, hogy a négy növény kombinációja Weighlevel-ben a hím Sprague-Dawley patkányok termogenezisének mérésével a barna adipocitákban egyaránt növeli a jóllakottságot és a termogenezist. Ez a rendszer általánosan elfogadott mint a zsírfogyás (zsírégetés) modellje. Az A. vulgaris L. aminjai főleg a cserzőanyagok, amelyekről beszámolnak, hogy hideg környezetben fokozzák az anyagcserét [11], a flavonoidok pedig az emésztőenzimek szabályozását és a kardioprotektív hatásokat mutatják [29]. A metabolikus stimuláció mellett [12] az olajfalevél-kivonatokról kiderült, hogy gátolják a bél glükóz felszívódását, és hipoglikémiás hatásról számoltak be, hipotenzív és hipolipidémiás tulajdonságokkal együtt [30–32]. Az olajbogyó levelekről tehát ismert, hogy csökkentik a zsírterhelést és a keringési zsírszintet. A jelentések szerint a vad menta ellazítja a gyomrot, és fokozza a gyomor kiürülését és az étel átjutását az emésztőrendszeren keresztül [33]. A köményről azt is beszámolták, hogy javítja a glükóz felhasználását, csökkenti az emelkedett vércukorszintet és elősegíti az emésztést az emésztőrendszeri nyálkahártya és a hasnyálmirigy emésztőenzimjeinek stimulálásával [34, 35].

Növényi kombinációnk túlsúlyos hatása mellett pozitív és kívánt antioxidáns aktivitást figyeltünk meg. Ez a megállapítás nagy jelentőséggel bír az elhízásban szenvedők számára, akiknél általában magas az oxidatív stressz. Ezen megállapítások alapján és figyelembe véve a hatékonyság időbeli elhatárolásának lehetőségét, további kutatásokat ösztönöznénk világszerte, különös tekintettel egy több központú nyílt vizsgálatra rendkívül elhízott alanyokban. A súlymérés kb. 0–50 kg-os várható 1 éves súlymérés esetén, napi háromszor és minden főétkezés előtt 30 perccel.