Az inzulinszerű növekedési faktor-1 az allergiás kontaktus szabályozó T-sejtek általi szuppresszióját indukálja

Cikk ábrák és táblázatok

Ábrák

A transzgénikus IGF-1Ea propeptid bőrben történő expressziója csökkenti a kontakt túlérzékenységi válaszok súlyosságát. (A) Gyulladásos reakció (fülduzzanat) 24 és 48 órával a CHS-válasz kiváltása után K14/IGF-1Ea egerekben, összehasonlítva a vad típusú (WT) egerekkel (n = 14-16, FVB egér törzs). A kísérletet hétszer megismételték független kutatók, és a grafikon két kísérlet összesített adatait ábrázolja. (B) Felső panelek: a vad típusú és a K14/IGF-1Ea fülek gyulladásának (nyilak) makroszkopikus jelzései 24 órával az előhívás után. Alsó panelek: A vad típusú és a K14/IGF-1Ea fülek immunhisztológiai elemzése H&E-vel festett fül keresztmetszetekben a kóros elváltozások és a gyulladásos beszivárgás vizualizálása céljából. A jelzett kísérleti csoportok egy reprezentatív festését mutatjuk be (n = 10/csoport, háromszor ismételve). (C) A patológia számszerűsítése a H&E-vel festett fülszakaszokban 24 órával az előhívás után, felhasználva az egy szakaszonkénti magok teljes számát (bal panel) vagy az infiltráció területét (jobb oldali panel). (D) A kiindulási rezidens CD45 + immunsejtek áramlási citometriás elemzése a K14/IGF-1Ea egerek bőrében és a vad típusú kontrollok. (E) A K14/IGF-1Ea egerek léptömege és a vad típusú kontrollok. * P

A transzgénikus IGF-1Ea propeptid expressziója a bőrben növeli a helyi Treg sejtek számát. (A) A Foxp3 és az IL-10 mRNS-expressziójának relatív szintje a vad típusú és a K14/IGF-1Ea egerek bőréből izolált CD4 + CD3 + CD45 + limfocitákban a CHS kezelés után 48 órával. A relatív expressziós értékeket normalizáltuk a háztartási gén hprt expressziójához. (B) T-sejtpopulációk áramlási citometriai elemzése: a T-sejtek (CD3 + a teljes CD45 + immunsejtek között), CD4 + T-sejtek (CD4 + CD3 + T-sejtek között) és Treg-sejtek (Foxp3 + CD4 + sejtek között) százalékos aránya vad típusú és K14/IGF-1Ea egerek bőrében 48 órával a kontakt CHS kezelés után. (C) A CD3 +, CD4 + és Treg sejtpopulációk (CD3 + az összes CD45 + immunsejt között, CD4 + a CD3 + T sejtek között, és alacsony CD25 + CD127 a CD4 + sejtek között) áramlási citometriás elemzése a bőrben és a lépben vitathatatlan K14/IGF-1Ea egerek és vad típusú kontrollok. * P

Az IGF-1R Treg sejt-specifikus törlése megsemmisíti az IGF-1 jótékony hatását. A fülduzzadásra adott válasz 24 és 48 órával az egerekben történt kiváltás után, az IGF-1R (IGF-1R CKO) Treg-sejt-specifikus deléciójával keresztezve a K14/IGF-1Ea egereket. A kontroll egerek az életkor és a nem szerint egyeztetett almatársak voltak ugyanazon az FVB × C57Bl/6xNOD vegyes genetikai háttéren. A vad típusú (WT) egerek nem hordozták sem a K14-IGF-1Ea transzgént, sem az IGF-1R CKO-t (K14-IGF-1Ea tömeg/tömeg, Foxp3Cre tömeg/tömeg, Igf1r fl/fl); A K14-IGF-1Ea egerekből csak az IGF-1R CKO hiányzott (K14-IGF-1Ea tg/wt, Foxp3Cre wt/wt Igf1r fl/fl). A kísérletet kétszer hajtották végre összehasonlítható eredményekkel, és a grafikon mindkét kísérlet összesített adatait ábrázolja (n = 13–20). ns, nem szignifikáns; * P

Az rhIGF-1 terápiás bejuttatása csökkenti a kontakt túlérzékenységi válaszok súlyosságát. (A) A C57BL/6 egereket szubkután implantáltuk rhIGF-1-t tartalmazó minipumpákkal. A kontroll egereket (Ctrl) álművelettel kezeltük. Az implantáció után egy héttel az egereket DNFB-vel szenzibilizáltuk, és a CHS-válaszokat 5 nappal később váltottuk ki (n = 8). (B) A vad típusú FVB egereket szenzibilizáltuk DNFB-vel és 5 nappal később váltottuk ki (n = 16). A kiváltás előtt 3 nappal és az azt követő 2 nappal az egereket helyileg 30 μl rhIGF-1 hidrogéllel (100 μg/ml rhIGF-1) kezeltük. (C) Az első kiváltás után 4 nappal és az rhIGF-1 után 2 nappal a kezelést abbahagyták, majd az egereket újra kiváltották (n = 8). (D) CHS vad típusú (K14-IGF-1Ea tömeg/tömeg, Foxp3Cre tömeg/tömeg, Igf1r fl/fl) és IGF-1R CKO (K14-IGF-1Ea tg/tömeg, Foxp3Cre tömeg/tömeg Igf1r) hatására indukálódott fl/fl) egerek. A kiváltás előtt 3 nappal és az azt követő 2 nappal az egereket helyileg 30 μl rhIGF-1 hidrogéllel (100 μg/ml rhIGF-1) kezeltük az egyik fülön; n = 6 (WT Ctrl), 3 (IGF-1R CKO Ctrl), 7 (WT rhIGF-1) és 14 (IGF-1R CKO rhIGF-1). * P