Aktuális gyűjtemény "Gyűjtemény a molekuláris és sejtes idegtudományról"

Aktuális gyűjtemény Agytudományok (ISSN 2076-3425). Ez a gyűjtemény a "Molecular and Cellular Neuroscience" szekcióhoz tartozik.

Ossza meg ezt az aktuális gyűjteményt

Szerkesztő

Aktuális gyűjtési információk

A Molecular and Cellular Neuroscience témájú gyűjtemény küldetése csúcskategóriás eredeti cikkek és kritikai áttekintések közzététele a neurológiai rendellenességek molekuláris és celluláris alapjairól. Különösen a folyóirat foglalkozik a molekuláris és sejtes idegtudomány minden aspektusával, az emberi populációk genetikai elemzésétől a szöveti tenyésztésen és a neurológiai rendellenességek állatmodelljein át. A lefedettség magában foglalja a normál idegrendszer fejlődési és felnőttkori plaszticitási mechanizmusait egyaránt megalapozó és a neurológiai diszfunkció következményeként, valamint a neuronok degenerációjában és helyreállításában bekövetkező molekuláris és sejtes események kísérleti elemzését. Különösen az utóbbi témával kapcsolatban ez a folyóirat-szakasz a szinaptikus fenntartásra, a szinaptikus de- és átszervezésre, a neuron-glia kommunikációra, a de- és a regeneratív neurobiológiára, a molekuláris genetikára, a jelátvitelre, a szinaptikus plaszticitásra és a sejthalálra összpontosít. Különösen érdekesek azok a vizsgálatok, amelyekben transzlációs kilátásokkal járó betegség állatmodelleket használnak, valamint kísérleti megközelítések, amelyek az ágyban fekvő-pad megközelítést alkalmazzák az emberi betegek betegségének aláírásainak érvényesítésére.

Dr. Andrew Clarkson
Gyűjteményszerkesztő

Kézirat benyújtási információk

A kéziratokat online kell benyújtani a www.mdpi.com címen, regisztrálva és bejelentkezve erre a weboldalra. Miután regisztrált, kattintson ide a beküldési űrlap megnyitásához. A kéziratokat határidőig lehet benyújtani. Valamennyi cikket szakértői felülvizsgálatnak vetjük alá. Az elfogadott dolgozatokat folyamatosan közzéteszik a folyóiratban (amint elfogadják), és együtt szerepelnek a gyűjtemény honlapján. Kutatási cikkeket, áttekintő cikkeket, valamint rövid közleményeket várunk. A tervezett dolgozatokhoz címet és rövid kivonatot (kb. 100 szó) lehet elküldeni a Szerkesztőségbe bejelentésre ezen a honlapon.

A beküldött kéziratokat nem szabad korábban közzétenniük, és máshol történő közzétételük megfontolása alatt sem kell (kivéve a konferencia anyagát). Az összes kéziratot alaposan bírálják egyetlen vak szakértői felülvizsgálati folyamaton keresztül. Útmutató a szerzőkhöz és a kéziratok benyújtásához szükséges egyéb lényeges információk az Útmutatók a szerzők számára oldalon találhatók. A Brain Sciences egy nemzetközi, szakértők által felülvizsgált, havi folyóirat, amelyet az MDPI jelentet meg.

Mielőtt elküldené a kéziratot, keresse fel az Útmutató a szerzőkhöz oldalt. A cikkfeldolgozási díj (APC), amelyet ebben a nyílt hozzáférésű folyóiratban kell közzétenni, 1600 CHF (svájci frank). A beküldött dolgozatokat jól kell formázni és jó angolul kell használni. A szerzők az MDPI angol szerkesztési szolgáltatását a megjelenés előtt vagy a szerző felülvizsgálata során használhatják.

Megjelent cikkek (13 cikk)

Ugrás: 2019-re

A piracetám megfordította a kokain globális DNS-metiláció (5-mc) és DNS-metil-transzferáz (DNMTs) génexpresszióra gyakorolt hatását. Az emberi primer asztrocitákat (2x106 sejt/ml) kokainnak (1 µM) és/vagy piracetámnak (10 µM) tettük ki 24 órán át. Az összes sejt-DNS-t használtuk a globális DNS-metiláció (5-mC) meghatározására ELISA-val (A), és a teljes RNS-t elemeztük (B) DNMT-1, (C) DNMT-3A és (D) DNMT-3B mRNS expresszióját. qRT-PCR. A háztartási gént β-aktint használtuk terhelés kontrollként. Az eredményeket három független kísérlet transzkripciós felhalmozási indexének (TAI) átlag ± SD-ként fejezzük ki. *** p 0,001, ** p 0,01, * p 0,05, NS - nem jelentékeny.

A piracetám megfordította a kokain hatását a primer asztrociták DNMT fehérje expressziójára. Az emberi primer asztrocitákat kokainnak (1 µM) és/vagy piracetámnak (10 µM) tettük ki 24 órán át, majd az összes és a magfrakciókat izoláltuk. Reprezentatív blotok (A, G), amelyek a DNMT-1, (B, H) DNMT-3A és (C, I) DNMT-3B expresszióját mutatják a teljes és a magfrakciókban. (D - F, J - L) Az egyes fehérjék szintjének denzitometriás elemzése a GAPDH vagy a lamin megfelelő szintjéhez viszonyítva, mint terhelés kontroll (a kontrollhoz viszonyítva többszörös változás). Az adatokat három független kísérlet átlag ± SD-ként fejezzük ki. *** p 0,001, ** p 0,01, * p 0,05, NS - nem jelentékeny.

A piracetám megfordította a kokain hatását a mitokondriális frakció DNMT fehérje expressziójára. Az emberi primer asztrocitákat (5x106 sejt/ml) kokainnak (1 µM) és/vagy piracetámnak (10 µM) tettük ki 24 órán át. A mitokondriális frakciókat SDS-PAGE-val oldottuk fel, és Western-blotokkal elemeztük (A) DNMT-1, (B) DNMT-3A és (C) DNMT-3B expresszióját. (D - F) Densitometrikus elemzés az egyes fehérjék szintjéről a COX-IV szintjéhez viszonyítva, mint terhelés kontroll (a kontrollhoz viszonyítva többszörös változás). Az adatokat három független kísérlet átlag ± SD-ként fejezzük ki. *** p p p G) A DNMT-1 immunfestést (vörös) és a sejtmagokat, amelyeket DAPI-val (kék) festettünk, konfokális mikroszkóppal figyeltünk meg (100-szoros nagyítás, 100 μm-es skála). (H) A DNMT-1 fluoreszcencia intenzitás (CTCF) számszerűsítése.

Az mtDNS metilációjának elemzése célzott következő generációs biszulfit szekvenálással (TNGBS). Az emberi primer asztrocitákat kokainnak (1 µM) és/vagy piracetámnak (10 µM) tettük ki 24 órán át. Az mtDNS metilációs profiljait TNGBS-sel határoztuk meg. Az eredmények a piracetam védőhatását mutatják be a kokain által kiváltott hipometilációra a különböző mitokondriális CpG helyeken: mt-RNR1, mt-RNR2, ND1, ND4, ND5, mt-CO1, mt-CO2, mt-ATP6 és mt-CYB (A - D ). Az eredményeket a metilezési százalék ± SD ± átlag, * p 0,05 átlagában fejezzük ki.

A piracetám megfordította a kokain hatását a TET gén expressziójára. Az emberi primer asztrocitákat (2x106 sejt/ml) kokainnak (1 µM) és/vagy piracetámnak (10 µM) tettük ki 24 órán át. Az (A) TET-1, (B) TET-2 és (C) TET-3 mRNS expresszióját qRT-PCR analízissel határoztuk meg. A háztartási gént β-aktint használtuk terhelés kontrollként. Az eredményeket három független kísérlet TAI átlagának ± SD-ként fejezzük ki. * p 0,05, NS - nem jelentékeny.

A piracetám megfordította a kokain hatását a TET fehérje expressziójára. Az emberi primer asztrocitákat (2,5x106 sejt/ml) kokainnak (1 µM) és/vagy piracetámnak (10 µM) tettük ki 24 órán át. Az összes sejtlizátumot SDS-PAGE-val választottuk el és Western-blot-analízissel elemeztük (A) TET-1, (B) TET-2 és (C) TET-3 expresszióját. (D - F) Densitometrikus elemzés az egyes fehérjék szintjéről a GAPDH szintjéhez viszonyítva, mint terhelés kontroll (a kontrollhoz viszonyított változás). Az adatokat három független kísérlet átlag ± SD-ként fejezzük ki. *** p 0,001, ** p 0,01, * p 0,05, NS - nem jelentékeny. (G) TET-1 (zöld) immunfestést és sejtmagokat, amelyeket DAPI-val (kék) festettünk, konfokális mikroszkóppal figyeltünk meg (nagyítás 100 × skála 100 μm). (H) A TET-1 fluoreszcencia intenzitás (CTCF) mennyiségi meghatározása.

Az anti-ZIP14 és anti-ZIP8 antitestek validálása és a ZIP14 és ZIP8 fehérjék kimutatása HIBCPP sejtekben. (A) A HEK293 sejteket kontroll üres vektorral (-) vagy FLAG-jelölt ZIP14-et (+) expresszáló vektorral transzfektáltuk. Időközben a sejteket negatív kontroll siRNS-sel (-) vagy ZIP14-re célzó siRNS-sel (+) transzfektáltuk. A ZIP14 és a FLAG kimutatására használt antitestek körülbelül 55 kDa-nál azonosítják a FLAG-jelölt fehérjét. (B) A HEK293 sejteket transzfektáltuk a kontroll vektorral (-) vagy egy FLAG-jelölt ZIP8-ot (+) expresszáló vektorral. Ezzel párhuzamosan a sejteket negatív kontroll siRNS-sel (-) vagy ZIP8-ra célzó siRNS-sel (+) transzfektáltuk. (C) az endogén ZIP8 siRNS leütése A549 sejtekben megerősítette, hogy a ZIP8 antitest 150 kDa nyomáson detektálja az endogén transzportert. A HIBCPP sejtekben ZIP14 (D) és ZIP8 (E) fehérjéket detektáltak. Az siRNS leütése megerősítette ezen fehérjék azonosságát. A plazmid vagy siRNS transzfekciót 24 órán át (A, B) vagy 48 órán át (C - E) hajtottuk végre a Western blot elemzés előtt, anti-ZIP14, anti-ZIP8 vagy anti-FLAG antitestek alkalmazásával. Beta Actint használtunk terhelés kontrollként.

A HIBCPP sejtek polarizált monoréteget alkotnak, amelyet szoros csatlakozások kötnek össze. A Transwell inszertbe történő beoltás után a HIBCPP sejtek összefolyásig nőnek. (A) 7 nap tenyésztés után a ZO-1 immunfluoreszcens antitestje (zöld) feltárja a sejt – sejt kereszteződések kialakulását. A magokat 4 ', 6-diamidino-2-fenilindol (DAPI) jelöli (kék). A bal kép maximális intenzitású vetítés, a jobb oldali kép egyetlen z-vermet képvisel. A piros nyilak a sejtréteg csúcsos oldalára mutatnak. Méretarány: 20 µm. (B) A HIBCPP egyrétegű integritását transzepithelialis elektromos ellenállás (TEER) méréssel figyeltük meg (a vetés utáni napokat az X tengely jelzi). Az adatokat átlagként ± S.D. négy független Transwell-kultúrából. (C) Az MRP-1-et, a choroid plexus szövet ismert bazolaterális transzporterét, és a DMT-1-t, egy apikális fehérjét, bazolaterális és apicalis markerként vizsgáltuk. (D) A ZIP14 és ZIP8 a membrán ellentétes oldalán expresszálódik egy polarizált HIBCPP sejttenyészetben. A GAPDH a biotinilezés után nem dúsul a membránfrakcióban, ezért úgy tűnik, hogy csak a teljes lizátumban van jelen.