A méhlepke (Galleria mellonella) allergiás reakcióit számos termolabilis antigén okozza

Hovatartozás

  • 1 Immunologia Clinica e Virologia, Dipartimento di Medicina di Laboratorio, Azienda Ospedaliera Santa Maria degli Angeli, Pordenone, Olaszország.

Szerzői

Hovatartozás

  • 1 Immunologia Clinica e Virologia, Dipartimento di Medicina di Laboratorio, Azienda Ospedaliera Santa Maria degli Angeli, Pordenone, Olaszország.

Absztrakt

Háttér: A méhlepke (Galleria mellonella) lárvákkal (Gm) való érintkezés és az azokhoz való érintkezés allergiás reakciót okozhat mind a horgászok, mind a tenyésztők körében. Leírtuk egy amatőr halász esetét, aki allergiás reakciót tapasztalt Gm alkalmazásával, de nem hőkezelt Gm (h-Gm) (múmiák) alkalmazásával. Ennek a tanulmánynak az volt a célja, hogy immunoblotting és radioallergosorbent teszt (RAST) gátlási kísérletekkel bemutassa az allergén epitópok elvesztését a h-Gm kivonatokban.

galleria

Mód: A Galleria mellonella lárvákat és a h-Gm-et homogenizáltuk, és 10% (w/v) koncentrációval 0,5 M foszfáttal pufferolt fiziológiás sóoldatban (pH 7,4), 0,5% NaN-t (3) tartalmazó pH = 7,4 mellett 16 órán át 4 ° C hőmérsékleten extraháltuk. 10% poliakrilamid előgyártott Nupage Bis-Tris gélen elektroforézist végeztünk 180 mA-en 1 órán át, és a rezolvált fehérjéket 0,1% Coomassie briliánskékkel festettük, és kiszámítottuk a molekulatömeget. Az allergén komponensek immunblot-detektálásához az oldott kivonatokat nitrocellulóz membránra vittük és a páciens szérumával inkubáltuk. A kötött specifikus IgE-t peroxidázzal konjugált anti-humán IgE-vel detektáltuk. A RAST gátlási kísérleteket Ceska módszer szerint végeztük.

Eredmények: A Gm és a h-Gm kivonatok fehérje profilja jelentősen különbözött a sávok számától, intenzitásától és helyzetétől, ami azt jelzi, hogy a hőkezelés módosítja a fehérjetartalom kémiai-fizikai jellemzőit. A Gm-kivonat erős színű sávot mutatott 73 kDa nyomáson, és több mint 20 komponens volt 12 és 133 kDa között; A h-Gm két fő sávot mutatott 77 és 38 kDa nyomáson, és körülbelül 15 halvány sávot 20 és 133 kDa között, nyilvánvalóan anélkül, hogy megfelelt volna a Gm kivonatban jelenlévő sávoknak. A páciens szérumával végzett immunblotolás a Gm-kivonattal számos reaktivitási sávot mutatott, 20 és 100 kDa közötti tartományban, és nem voltak felismerhető sávok, csak h-Gm-mel szórt kenet volt. RAST-gátlási kísérletben használva a h-Gm kivonat képtelen volt versenyezni a Gm-mel a páciens IgE szérumához való kötődésért.

Következtetések: Úgy tűnik, hogy a h-Gm elveszíti az allergén epitópokat, és két előnye van a horgászok számára: elkerülni az új lehetséges szenzibilizációkat, valamint az allergiás tüneteket az érzékeny embereknél, anélkül, hogy megzavarná képességeiket és elégedettségüket a horgászatban.