A fürjtojások metabolikus hatása cukorbetegség által kiváltott patkányokban: összehasonlítás a csirketojásokkal

Eric Lontchi-Yimagou

1 Molekuláris orvostudományi és anyagcsere laboratórium, Biotechnológiai Központ, Yaoundé Egyetem, Yaoundé, Kamerun

hatása

Agatha Tanya

2 Népegészségügyi Tanszék, Orvostudományi és Orvostudományi Kar, Yaoundé Egyetem, Yaoundé, Kamerun

Carine Tchankou

3 Táplálkozási és táplálkozási biokémiai laboratórium, Természettudományi Kar, Yaoundé Egyetem, Yaoundé, Kamerun

Judith Ngondi

3 Táplálkozási és táplálkozási biokémiai laboratórium, Természettudományi Kar, Yaoundé Egyetem, Yaoundé, Kamerun

Julius Oben

3 Táplálkozási és táplálkozási biokémiai laboratórium, Természettudományi Kar, Yaoundé Egyetem, Yaoundé, Kamerun

Absztrakt

Háttér

A fürjtojásokat mint élelmiszereket a közelmúltban vezették be egyes kameruni lakosok étrendjébe. Ezeket a tojásokat a helyi piacokon értékesítik, de sok megalapozatlan egészségügyi állítással rendelkeznek. Az egyik állítás szerint a fürjtojások csökkenthetik a cukorbetegek vércukorszintjét. Ezért értékelni kellett a fürjtojás fogyasztásának a cukorbetegség által kiváltott patkányok vércukorszintjére, lipidprofiljaira és oxidatív stressz paramétereire gyakorolt ​​hatását.

Mód

Húsz, átlagosan 250 g tömegű Wistar patkányt osztottak négy, egyenként öt patkányból álló csoportba. Az 1. csoport normál vércukorszintű patkányokból állt, a másik három csoport (2., 3. és 4. csoport) cukorbetegség által kiváltott patkányokból állt, amelyeket streptozotocin intravénás injekciójával értünk el. 16 nap alatt az 1. és 2. csoportba tartozó patkányok desztillált vizet kaptak; és a 3. és 4. csoportba tartozó patkányok fürjt, illetve csirke tojást kaptak, gastrooesophagealis próbával, 1 ml/200 g testtömeg dózisban. Az éhomi vércukorszintet minden csoportban meghatároztuk a cukorbetegség kiváltását követő 1., 7., 14. és 17. napon. A 17. napon az éhomi patkányokat feláldoztuk, és vér- és májmintákat gyűjtöttünk biokémiai elemzésekhez.

Eredmények

17 nap alatt a fürj és a csirke tojás fogyasztása nem volt hatással a cukorbeteg patkányok vércukorszintjére. Az összes koleszterinszint magasabb volt a 3. csoportban (75,59 mg/dl) és a 4-ben (59,41 mg/dl), mint a 2. csoportban (55,67 mg/dl), bár ezek a különbségek nem voltak szignifikánsak (mindegyik p> 0,05). A triglicerid szint szignifikánsan magasabb volt (p Kulcsszavak: cukorbetegség, hiperlipidémia, oxidatív stressz, fürjtojás, tyúktojás

A 2-es típusú diabetes mellitus (T2DM) prevalenciája világszerte nőtt (1, 2), beleértve Afrikát is, ahol a diabéteszes esetek számának legnagyobb arányos növekedése (90%) 2030-ra várható (3, 4). Az ülő életmód, az elhízás és az egészségtelen táplálkozási magatartás a T2DM leggyakoribb kockázati tényezője (5). A T2DM súlyos szövődményekhez vezet, mint például idegrendszeri rendellenességek, vesebetegségek és szembetegségek; így megelőzését és kezelését prioritásnak kell tekinteni (6). Az étrendet alkalmazták a T2DM megelőzésében és kezelésében. Az elhízás kezelésére használt stratégiák közé tartozik a magas rosttartalmú, alacsony szénhidráttartalmú és alacsony zsírtartalmú étrend használata (7, 8). A hagyományos étrendi és viselkedési kezelések a hosszú távú kezelésben kudarcot vallottak.

Mód

Állatkezelés és etikai megfontolások

Felnőtt 12 hetes, átlagosan 250 g tömegű Wistar albínó patkányokat használtunk ebben a vizsgálatban. A patkányokat (n = 20) a kameruni Yaoundé I. Egyetem Orvostudományi és Orvostudományi Kar állattartó házából vásároltuk. Az állatokat 25 ° C-on tartottuk egy 12/12-órás világos/sötét ciklusú helyiségben, és szabadon hozzáférhettek a vízhez és az élelemhez. A tanulmányt az intézményi állatetikai bizottság hagyta jóvá.

Fürj és csirke tojás

A különböző patkánycsoportok összehasonlító vizsgálatának lehetővé tételéhez fürj- és csirketojást egyaránt használtunk. Mindkét típusú tojást ugyanattól a tenyésztőtől vásárolták a Biyem-Assi szomszédságban (Yaoundé-Kamerun), hogy elkerüljék az élelmiszer-minőséggel kapcsolatos variációkat, amelyek módosíthatják a tojások összetételét (14).

Tojás beadása

Minden reggel fürj- és csirketojást adtak minden patkánynak gasztro-nyelőcső szondával 1 ml/200 g testtömeg dózisban. Ez az adag tükrözte azt a dózist, amelyet a legtöbb kameruni lakos használt a kezelésére. A tojást eltörték, főzőpohárba helyezték, majd üvegpálcával homogenizálták. A patkányoknak adott tojásmennyiséget egy fokozatos fecskendővel a gasztro-nyelőcső szondájába húzták patkányoknak történő beadás céljából.

A fürj és a csirke tojás táplálkozási hatásainak értékelése vércukorszint cukorbetegség által kiváltott patkányok

Cukorbetegség kiváltása patkányokban

A cukorbetegség kiváltására egyetlen intraperitoneális dózist, 55 mg/kg sztreptozotocint (STZ; Sigma-Aldrich, Németország) adtak be (15). 72 óra elteltével a kifejezett hiperglikémiás (éhomi vércukorszint 250 mg/dl) patkányokat cukorbetegeknek tekintették. Az állatokat négy, egyenként öt patkányból álló csoportba osztottuk. A négy csoportot a következőképpen kezeltük:

Csoport leírás
1Normál/kezeletlen patkányok (negatív kontroll) desztillált vizet kaptak 1 ml/200 g testtömeg-dózisban.
2Cukorbetegek/kezeletlen patkányok (pozitív kontroll) desztillált vizet kaptak 1 ml/200 g testtömeg-dózisban.
3Cukorbetegek/kezelt patkányok fürjtojást kaptak 1 ml/200 g testtömeg-dózisban.
4Cukorbetegek/kezelt patkányok csirke tojást kaptak 1 ml/200 g testtömeg-dózisban.

Vérgyűjtés

Meghatároztuk a fürj- és csirketojások vércukorszintre, lipidprofilra és oxidatív stressz paraméterekre gyakorolt ​​hatását a négy patkánycsoportban. Az 1. csoport normál vércukorszintű patkányokból állt, a másik három csoport (2–4) pedig cukorbetegség által kiváltott patkányokból állt STZ intravénás injekciójával. 16 napig az 1. és 2. csoport desztillált vizet kapott; a 3. és 4. csoport fürj és csirke tojásokat kapott egy gasztro-nyelőcső próbából 1 ml/200 g testtömeg-dózisban. A patkányok 16 napig voltak ezen a speciális kezelésen, szabadon hozzáférhettek a vízhez, és ugyanazon a táplálékon voltak. Az éhomi vércukorszintet minden csoportban meghatároztuk a cukorbetegség kiváltását követő 1., 7., 14. és 17. napon. A 17. napon az éhező patkányokat jugularis venesekcióval feláldoztuk könnyű kloroformos érzéstelenítés után.

Minden patkány esetében a vért etilén-diamin-tetraecetsav-csövekbe vettük, és szobahőmérsékleten hagytuk alvadni. Ezt követően a plazmát elválasztották az alvadéktól 1126 g-os centrifugálással 15 percig. A plazmát tiszta palackokba gyűjtöttük, és -20 ° C-on tároltuk, amíg szükséges volt. Az állatok boncolása után a szerveket jégre tettük és a lehető leggyorsabban feldolgoztuk.

Májhomogenátumok előállítása: Körülbelül 10% (w/v) szövethomogenátumot állítunk elő 10% foszfáttal pufferolt sóoldatban (pH 6,4) mikrohomogenizátor (Physcotron, Niti-on Inc., Chiba, Japán) alkalmazásával. A felülúszót a homogenátumból kaptuk, miután 15 percig 3000 fordulat/perc sebességgel centrifugáltuk. A mintát ezután -20 ° C-on tárolták, amíg fel nem használták a malondialdehid (MDA), a hidroperoxid-koncentráció és a kataláz aktivitásának meghatározására.

Vörösvértestek hemolizátumainak előállítása: A teljes vér centrifugálása után 100 ul pelletet pipettázunk egy másik csőbe, majd kétszer mossunk 2 ml 0,9% -os nátrium-klorid-oldattal, és 1126 g-on 10 percig szobahőmérsékleten centrifugáljuk. Hemolizátumokat kapunk 2 ml desztillált víz hozzáadásával, és -20 ° C-on tároljuk. Ezt a hemolizátumot használták fehérje-vizsgálatokhoz és a kataláz aktivitás meghatározásához.

Biokémiai elemzések

Plazmát készítettünk a vérmintákból, amelyeket patkányokból gyűjtöttünk reggel 17-én, egy éjszakai 12 órás böjt után. A plazma glükózszintjét GlucoPlus ™ glükométerrel határoztuk meg. Az összes koleszterint és a triglicerideket enzimatikusan mértük standard enzimatikus készletekkel (Sigma Diagnostics). Meghatároztuk az oxidatív stressz markerek, például az MDA szint, a hidroxil (OH) gyök szintjét és a kataláz aktivitását is.

A fürj- és csirketojások cukorbetegség által kiváltott patkányok lipidprofiljára gyakorolt ​​hatásának értékelése

A plazma teljes koleszterinszintet és a triglicerideket enzimatikusan becsültük Watson (16), illetve Fossati és Prencipe (17) szerint a Ran-dox, Ltd., Co. (Egyesült Királyság) kereskedelmi készletei felhasználásával.

A fürjtojások antioxidáns tulajdonságainak értékelése cukorbetegség által kiváltott patkányokon

A teljes fehérjetartalmat az összes összegyűjtött mintában (eritrociták hemolizátja, plazma és májhomogenátumok) értékeltük a Cypress Diagnostics által forgalmazott „teljes fehérje kolorimetriás teszt Biuret” készlet használatával.

Az MDA szintet tiobarbitursavval spektrofotometriásan becsültük Wilbur és munkatársai által leírt módszerekkel. (18) A tiobarbitursav reagál a lipid-hidroperoxidok hidrolízisével előállított plazma MDA-val, rózsaszínű-vörös színű komplexet képezve, nagy abszorbanciával 532 nm-en. Az eredményeket mikromol/literben fejezzük ki. Ezt a komplexet általában az 1,1,3,3-tetraetoxi-propánból ugyanazon reakciókörülmények között előállított MDA-standardok alapján számszerűsítik.

Az OH gyökök szintjét a vérplazmában és a máj homogenátumaiban mértük Jiang és munkatársai által leírt protokoll szerint. (19) Ez a módszer azon az elven alapul, hogy savas közegben a peroxidion Fe 2+ -ot oxidál Fe 3+ -gá, amely azután xilenol-naranccsal reagálva 560 nm-en abszorbeálódó komplexet képez.

A kataláz aktivitást hemolizátumokban és máj homogenizátumokban Sinha (20) által korábban leírt módon vizsgáltuk. A hidrogén-peroxid alikvot részét (0,8 ml) adagoltuk egy Eppendorf-csőbe. Foszfátpuffert (1,0 ml) és (0,002%, v/v) hígított homogenát/hemolizátumot (125 ui) adunk hozzá. A reakcióelegyet (0,5 ml) 5% dikromát-reagensbe (1,0 ml) adagoljuk és erőteljesen rázzuk. Az elegyet Clifton vízfürdőben 10 percig melegítettük, majd hagytuk lehűlni. Az abszorbanciát 570 nm-en spektrofotométerrel (BioMate 3S UV-Visible, Thermo Scientific, Wohlen, Svájc) vettük fel. A kapott abszorbanciát a következő standard görbéből extrapoláltuk: y = 0,0028x + 0,0132. A kataláz aktivitást ezután egység/perc/fehérje milligrammban fejeztük ki: kataláz (egység/mg fehérje) = (Abs/min × 30 000 egység)/(40 cm/M × mg fehérje) × df, ahol df hígítási tényező és Abs az abszorbancia.

Statisztikai analízis

Az eredmények statisztikai elemzését az SPSS 10.1 for Windows (SPSS, Chicago, IL, USA) alkalmazásával végeztük. Az eredményeket átlag ± szórásként adjuk meg. Az összehasonlítást egyirányú varianciaanalízissel végeztük, amelyet Duncan többszörös tartományú post hoc teszt követett. P értéke 1. ábra. A fürj- és csirketojások 16 napos adagolása cukorbeteg patkányokon nem befolyásolta a vércukorszintet. 7, 14 és 16 napos kezelés után nem volt szignifikáns különbség a vércukorszintben a desztillált vizet kapó pozitív kontroll diabéteszes patkányok és a fürj- és tyúktojással kezelt diabéteszes patkányok között (p> 0,05).